将贴有标签的 TSA 和 SAB 沉降板放置在工作区域附近，但放置在不会干扰测试的区域。记录采样开始时间。无菌地打开两个板，将盖子放在远离工作区的生物安全柜的清洁表面上长达四个小时，以防止琼脂变干。
在处理结束时，关闭板盖并记录采样停止时间。松散地将盘子装袋并孵育培养物。对于戴手套的指尖采样，获取两个标记的TSALT板。
无菌取下板盖并将其放在远离采样区域的干净工作表面上。轻轻地将每个手指和拇指的垫子放在盘子的表面上。使用足够的力在琼脂上产生轻微的凹陷，而不会使琼脂表面破裂。
无菌地将盖子放回盘子上。在取样完成后对双手进行消毒后，松散地装袋板并孵育培养物。对于直接接种，按照美国药典方法，将TSA和SAB沉降板放在生物安全柜中。
准备好机柜并暂存材料后，记录采样开始时间。获得测试物品和相关胰蛋白酶大豆肉汤和巯基乙酸盐液体培养基瓶。如果瓶子有隔膜，请取下每个瓶子的保护盖，然后用无菌酒精湿巾擦拭隔膜。
涡旋测试物品以确保均匀的悬浮液，并使用无菌注射器和皮下注射针头用有效体积的测试物品接种瓶子。用无菌酒精湿巾擦拭隔膜并插入无菌排气装置，以便在孵育期间进行空气交换。对该会话的每个测试文章重复这些步骤。
无菌关闭 TSA 和 SAB 沉降板并记录采样结束时间，然后再进行戴手套的指尖采样。用70%无菌异丙醇擦拭手套，松散地装袋板并孵育培养物。将所有测试材料从生物安全柜中移出。
同样，对于直接接种，按照NIH替代无菌测试方法，将TSA和SAB沉降板放入生物安全柜中并记录采样开始时间。获得测试物品和相关的IFA Plus标签，IFN Plus标记和SAB板。取下IFA Plus和IFN Plus瓶子的保护盖，然后用无菌酒精湿巾擦拭隔膜。
涡旋测试物品后，使用无菌注射器和皮下注射针头用有效体积的测试物品接种瓶子，然后再次擦拭隔膜。在BACT/ALERT双T仪器上孵育瓶子。使用移液器，用经过验证的测试物品接种SAB板，并使用无菌环划线进行分离。
静置10分钟，以确保倒置孵育时样品不会跑到板盖上 将接种有测试物品的每个SAB板放入塑料袋中。松散地绑住它们。无菌关闭 TSA 和 SAB 沉降板。
在板上记录采样结束时间，并进行戴手套的指尖采样。取样后，用70%酒精擦拭手套。用酒精擦拭手套后松散地袋装板并孵育培养物。
此处显示了TSA空气沉降板，该板显示了在生物安全柜中的被动空气过程监测期间培养的污染物的单个菌落。TSALT表面采样板具有两个不同菌落形态的三个菌落形成单元，如图所示。在板边缘具有单个菌落的TSALT表面培养表明在采样过程中无菌处理不良。
该图显示了使用每个手指或拇指的最大表面积获取戴手套的指尖样品的正确方法。此处显示了仅对指尖进行采样的错误过程。此处显示了肉眼可见的模具球示例，这些模具球未能被BACT/ALERT系统自动检测到。
基于这些发现，建议对所有BACT/ALERT瓶进行终端目视检查，并使用NIH替代无菌测试方法添加用于真菌培养的SAB板。
