要开始双色F1拟南芥的药理学分析,解剖并去除七天龄转基因幼苗的子叶。在 1.5 毫升微量离心管中加入 500 微升 30 微摩尔布雷菲尔丁 A 或 BFA 溶液。将解剖的幼苗浸入其中。
将10毫升注射器紧紧连接到微量离心管上,并施加真空一分钟。在成像前将样品在溶液中孵育30分钟之前取出注射器。接下来,将解剖的七天龄幼苗浸入25毫摩尔麦芽汁中。
在将浸入的样品孵育30分钟之前,施加真空一分钟。检查转基因植物中的ERL-1运输路线表明,暴露于Brefeldin A溶液30分钟导致在称为BFA小体的大隔室中检测到ERL-1-YFP。它表明Brefeldin A可以阻断ERL-1的贩运,表明ERL-1的回收或内吞作用。
当转基因用麦芽汁酶处理30分钟时,ERL-1-YFP突出显示了称为WM体的环状结构。它表明ERL-1-YFP被运输到多泡体,表明ERL-1遵循液泡降解的途径。