从含有电穿孔罗伊氏乳杆菌细胞的MRS琼脂平板中挑选任何菌落,并接种到含有每孔过滤灭菌MRS肉汤和适当选择抗生素的96孔微孔板中。在 37 摄氏度下有氧孵育 24 小时,不要摇晃。第二天,罗伊氏乳杆菌将在固定相中沉淀出培养基。
通过移液重悬培养物。将 200 微升培养物加入平坦、透明的底部 96 孔板中。将板转移到读板器上,测量M樱桃二号和其他相关报告基因的光密度和荧光。
在氧气存在下,菌落形态发生明显变化。在低氧条件下,菌落呈白色、不透明、光滑和圆形。在部分或渗漏的条件下,菌落出现起伏和伞形。
而在大气氧气水平下,菌落总是显得低诱饵,圆形和干燥。在野生型L.rueteri中,菌落之间的生长和报告蛋白表达不同,因此难以准确推断。质粒固化和再转化可以导致更稳定的表达,但这是一种罕见且独特的发生,依赖于自发发生的更稳定的突变表型。