将罗伊氏乳杆菌接种到含有适当抗生素的 10 毫升 MRS 肉汤中，并在 37 摄氏度下有氧孵育过夜。第二天，在预冷的离心机中离心培养物弃去上清液并在两毫升标准P1缓冲液中洗涤沉淀再次离心并弃去上清液，然后将沉淀重悬于250微升改性P1缓冲液中。在 37 摄氏度下孵育一到两个小时。
接下来，加入 250 微升缓冲液 P2 并通过倒置四到六次混合。五分钟后，加入350微升缓冲液N3，倒置试管混合。以10， 000 g离心10分钟，并将尽可能多的上清液转移到离心柱中。
再次离心60秒，丢弃流出物。用500微升缓冲液PB洗涤离心柱并离心，丢弃流出物。用750微升缓冲液PE洗涤离心柱，并以10， 000 G离心60秒。
丢弃流通物并再次离心60秒以除去任何残留的缓冲液。将离心柱放入1.5毫升微量离心管中。向离心柱过滤器中加入20至30微升不含Dnase和RNase的双蒸水，静置一至两分钟，然后以10， 000 G离心60秒。
使用质粒特异性引物进行标准PCR反应，洗脱液提供模板DNA，包括来自大肠杆菌小型制备的质粒的阳性对照。通过琼脂糖凝胶运行小型制备洗脱液会导致涂片，而不是可观察到的条带。然而，使用洗脱液作为DNA模板的后续PCR会产生预期的条带大小。
