首先,将大鼠固定在塑料约束锥中,将锥体的大端包围在尾巴的底部周围。确保动物在整个过程中舒适且呼吸不受限制。将尾巴浸入温水中约一分钟以扩张静脉,然后用纸巾擦干尾巴。
在约束器中,将动物面朝下,尾巴放在加热垫上。要选择合适的尾静脉进行采样,请将整个动物向右侧或左侧旋转。使用尾巴的末端三分之一进行血管穿刺,因为血管在这个区域变得更加浅表。
在穿刺部位用70%乙醇湿巾擦拭尾巴,并将其放在加热垫的边缘,在尾巴的末端三分之一处形成一个角度。这将静脉带到表面,并为取样创造更多空间。对于血液采样,将柱塞在注射器中来回移动几次以平滑退出,然后拉动柱塞以在注射器中产生负压。
用非惯用食指和中指将尾巴平放在加热垫上。将中指放在近端,食指远端放置,穿刺部位放在这两个手指之间。将胰岛素注射器滑过食指,针眼朝上,直到插入静脉。
这会在针和尾部之间产生 35 度角。一旦针头进入静脉,血液就会流入注射器。以稳定的速率缓慢抽出注射器的柱塞以收集所需的体积。
从尾部取出注射器,让血滴在尾巴的穿刺侧形成。在非无菌程序的情况下,吸出这些血液以收集更多微升的血液。对穿刺部位施加压力以止血,并用新的酒精湿巾擦拭该区域。
将大鼠从锥体中取出后,将其放回笼子。将麻醉下尾静脉穿刺法的成功率与静脉穿刺法的成功率进行比较。有趣的是,在麻醉下,尾静脉变得非常不可靠,成功率仅为25%,清醒大鼠尾静脉穿刺和麻醉下静脉穿刺的成功率几乎相似。
无麻醉尾静脉穿刺法和麻醉静脉穿刺法不到6分钟,麻醉下尾静脉穿刺法因多次失败,抽血8分钟以上。