Isolation of Single Nuclei from Frozen Mammalian Tissues for Single Nuclei RNA Sequencing

首先，启动机器人解离器。通过将屏幕右上角的滑块设置为“冷却”来打开冷却，然后单击它开始冷却，使滑块显示为橙色。接下来，检查随附的 NSR 和 NIB 瓶是否有足够的液体并正确冷却。

从零下 80 摄氏度的冰箱中取出组织样本，并立即将它们放在干冰上。使用预冷的手术刀，将组织切成 15 至 50 毫克的块，放在预冷的培养皿或金属板上，放在干冰上。从冰箱中取出细胞核分离盒并打开包装。

取下研磨机，将 15 微升 RNA 抑制剂移液到墨盒底部。使用镊子将组织样本放在墨盒底部。接下来，选择在仪器上运行协议，然后单击左上角的“细胞核”选项。

从菜单中，选择“低体积细胞核分离协议”，然后单击“修改”以验证中断速度是否设置为最快。然后，打开仪器门。将墨盒插入指定位置。

旋转墨盒锁，然后滑入载物台，直到红色旋钮卡入到位。关上门，然后单击“下一步”开始细胞核提取运行。运行完成后，提起红色旋钮并拉出载物台，从仪器上取下唱头。

立即将墨盒放在冰上。