Autofluorescence Blocking and Antigen Retrieval in Tissue Samples

首先，根据制造商的说明准备 10 倍浓缩柠檬酸盐、目标修复溶液或 pH 值为 6 的 TRS。用去离子水将其稀释至1：10的比例。然后将塑料染色罐中的溶液加热至96摄氏度。

从载玻片架上取下载玻片并将它们放入湿室中。接下来，将一滴或两滴自发荧光还原剂移液到每个组织样品上，并将样品孵育五分钟。将载玻片堆叠回载玻片架中，并在 60% 乙醇中向上和向下冲洗一分钟，以除去未使用的自发荧光还原试剂。

将载玻片架浸入去离子水中五分钟。将载玻片转移到装有预热 TRS 缓冲液的染色罐中，用于抗原修复。将载玻片在 96 摄氏度的水浴中孵育 10 分钟。

取出染色罐，让它冷却至室温约 60 至 90 分钟。接下来，取出 TRS，同时将载玻片放在罐子中。用含有 0.05% 吐温的 TRIS 缓冲盐水在 pH 7.4 下冲洗载玻片两次，每次 3 分钟，以去除任何残留的 TRS 残留物。

将载玻片放在潮湿的腔室中。用纸巾轻轻擦去载玻片上多余的水，然后用疏水屏障笔将每个样品圈起来，以防止抗体溶液流失。