麻醉小鼠后，轻轻捏住小鼠的一只爪子，检查小鼠是否被充分麻醉。施用1%托吡卡胺滴眼液以散瞳小鼠的眼睛并等待30秒。然后，为了减少眼球运动和眨眼，将0.5%盐酸丙丙卡因滴在双眼上，然后涂上润滑剂眼凝胶滴剂，并将鼠标放在加热水垫上。
制备含有等体积吲哚菁绿或ICG和荧光素染料的染料混合物。通过腹膜内注射将250微升混合物注射到小鼠后腿附近的左下象限，使其平行于皮肤定位以防止器官穿孔。小心地缩回柱塞，确保没有血液进入注射器盖。
以稳定的速度逐渐注入染料。接下来，将鼠标放在成像平台的加热垫上。将鼠标身体的位置调整为相对于相机的 45 度角，然后轻轻地将头部略微向下倾斜。
用棉签轻轻擦拭要成像的眼睛，以去除润滑剂眼药水或凝胶层。将相机朝向鼠标的眼睛，然后从采集模块中选择FA通道。安排鼠标的头部，使视神经在屏幕上居中，避免倾斜激光扫描检眼镜的需要。
现在，切换到采集模块上的ICGA通道。一旦眼睛占据了成像软件的整个屏幕，旋转采集模块上的圆形黑色按钮以调整图像感光度。使用检眼镜的旋钮微调焦距。
接下来，按采集模块上的圆形黑色按钮对图像进行归一化。归一化后，单击触摸屏面板上的 ACQUIRE 按钮以保存图像。使用采集模块切换到 FA 通道，并调整每个图像的灵敏度和焦点，如前所示，以捕获脉络膜新生血管或 CNV 病变的渗漏。
然后在注射后三到四分钟捕获 ICGA 和 FA 早期阶段的图像。捕获所有必要的图像后，将凝胶润滑剂或软膏涂抹在鼠标的眼睛上。毛细血管 CNV 在年轻小鼠的 CNV 病变中占主导地位。
相比之下，老年小鼠表现出小动脉 CNV，其特征是大口径血管、血管环和吻合口连接。年轻小鼠和老年小鼠在年轻小鼠的ICGA图像 FA.In 都显示出视网膜血管系统的清晰可见度，视网膜血管系统不可见，脉络膜血管出现褪色。在老年小鼠的ICGA图像中，可以观察到部分视网膜血管系统，而脉络膜血管似乎褪色。
与年轻小鼠的毛细血管CNV相比，老年小鼠的小动脉CNV表现出更大的CNV大小和显着更多的渗漏。
