首先向麻醉的大鼠皮下注射每毫升0.3毫克的丁丙诺啡。将大鼠安装在立体定位框架上。接下来，用剃须刀剃掉头部的毛发。
用无菌棉签用三轮交替的 10% 聚维酮碘和酒精对皮肤进行消毒，每次向不同方向摩擦三到五秒钟。涂抹眼药膏以防止干燥。现在，使用无菌手术刀沿着头部中线切开两厘米的切口，然后使用无菌拭子和生理盐水仔细清洁头骨。
使用安装在立体定位装置上的 10 微升汉密尔顿注射器针头识别前囟，并将其设置为 00。将设备向前、后向和外向坐标移动。使用牙钻创建一个一毫米的毛刺孔。
将 4 微升释放混合物装入 10 微升 Hamilton 注射器中，然后小心地用钝边或锥形边缘降低针头以与硬脑膜接触。将针头插入所需的 3.5 毫米深度。以每分钟一微升的速度注入两微升释放鸡尾酒。
将针头留在原位再放置两分钟，然后慢慢取回它以防止释放鸡尾酒浮出水面。用 5/0 尼龙缝合切口，并用防腐剂清洁缝合区域。然后将动物转移到手术后监测区。
注射超过三微升的释放混合物导致非特异性机械损伤。注射两微升的鸡尾酒导致双皮质素免疫阳性簇的出现，即使在八个月后也可见。脑免疫染色显示室管膜层上的剥蚀位点，接近仅注射的水平。
在室管膜下区的后部和前部区域观察到室管膜层扰动逐渐减少。
