首先在工作台面上放置干净的台垫或悬垂材料。将异氟烷蒸发器的鼻锥粘在表面上，确保其背对实验者。将一根 10 毫米长、27 号针头和 45 度斜面连接到 5 微升玻璃注射器上。
在针头上添加硅橡胶管，使尖端突出 3.5 毫米，并用实验室胶带将管子固定到注射器主体上。接下来，将三微升注射介质吸入玻璃注射器中，最初吸入超过需要的量，然后弹出多余的注射液，直到只剩下三微升。在计数模式下启动实验室计时器并将其放置在注射过程中，以便于查看。
在练习横向和尾部移动针头后，首先用碘清洁注射部位，然后用酒精清洁三次，准备麻醉小鼠进行注射。使用 18 号针头识别注射部位，将其穿过开颅部位。要注射鼠标，首先，用非惯用手牢牢握住鼠标的头部。
将头部平放在工作台面上。接下来，将玻璃注射器的针头穿过颅骨上的孔，直到管子停留在小鼠的皮肤上。将注射器垂直于冠状面和矢状面，在一分钟内缓慢注入培养基。
再握住注射器和针头一分钟，以尽量减少回流。然后，慢慢缩回针头。将鼠标从鼻锥上取下。
使用无菌纱布清除注射部位的任何血液，并将小鼠放在笼子加热器上的笼子中，直到醒来。短暂暴露于气体麻醉和单独向心室系统注射 3 μL 液体不会改变搏动性促黄体生成素分泌。注射束在神经组织中可见，并与侧脑室相交。
