使用 Lustro 对酵母进行自动化高通量光遗传学表征

首先设置自动化工作站。结合微孔板照明设备，例如 optoPlate，可以方便地访问机器人夹持臂。接下来，使用可用的 MATLAB 脚本处理电子表格，以对 optoPlate 进行编程。

通过闪烁到光板上来执行光刺激程序。要对机器人进行编程，请排除任何潜在的错误，以确保载体和LabWare定义的正常运行。在脚本循环中多次运行空板，以验证机器人夹持臂是否能够准确拾取和放置板。

接下来，从板中选择菌落以设置样品板。然后将它们接种到玻璃培养管中的三毫升合成完全培养基中。将这些培养物在 30 摄氏度的黑暗中在滚筒上孵育过夜。

在比色皿中，将 200 微升培养物稀释在一毫升合成完全培养基中。使用分光光度计记录其光密度。接下来，在玻璃培养管中将每个过夜培养物稀释至0.1的光密度。

将稀释的培养物移入 96 孔板中。包括含有空白培养基和非荧光细胞的孔作为阴性对照。将样品板在 30 摄氏度的振荡培养箱中孵育 5 小时。

现在，将样品板放在加热器振荡器上。通过单击“运行”启动自动化脚本。在酶标仪上记录初始测量值后，通过打开照明设备的电源板来启动光刺激程序。

光遗传学菌株随时间变化的荧光值表明，整体荧光水平与光刺激的占空比成正比。相应的光密度值是一致的，表明生长不受不同光照条件的影响。不同的光遗传学菌株对光脉冲强度、周期和占空比变化采用不同的响应。