Virus-Infected Potato Plant Preparation for Microscopic Lesion Recording

首先，将感染病毒的马铃薯植株转移到保持在 22 摄氏度的生长室中。挑选一株植物进行观察，并用胶带将第二片接种的叶子完全固定。接下来，将数码显微镜连接到计算机并启动图像捕获软件。

将叶子放在显微镜下。然后，使用刻度盘对焦于叶子的表面。要调整相机设置，请单击“设置”按钮。

现在，将亮度设置为 64，将对比度设置为 14，将色调设置为零。接下来，调整白平衡。然后将饱和度设置为 47，锐度设置为零，将伽玛设置为 5。

单击图像捕获图标，然后选择“延时视频”选项。接下来，将图像捕获设置为每 15 分钟一次，总共 24 小时。按“开始”按钮开始图像捕获。

要保存捕获的图像，请选择所有图像，然后单击“保存”图标。现在，选择导出选项。然后，将每英寸点数设置为最大值。

保存后，从程序中删除所有图像。要编辑图像，请启动 ImageJ 等编辑软件。单击“文件”，然后选择“导入”，然后选择“图像序列”以从单个视野导入图像的时间序列。

粘贴已保存照片目录的路径，然后按确定。转换完成后，ImageJ 将自动启动一个内部视频播放器，显示完成的视频。单击“文件”，然后单击“另存为”，然后选择AVI格式以导出视频文件。

当一个小窗口打开时，将帧速率设置为 0.3 FPS，然后按“确定”将视频存储为 AVI 文件。使用至少三到四个完全发育的叶子的三到四周龄接种马铃薯植株进行数字显微镜分析。每隔 15 分钟观察接种叶片上的相同区域，以确定病变的发生和随时间的扩展。

观察 14 小时时，未见病变。大约 90 分钟后，记录了一个可见的病变。两小时后病变开始扩大，并在接下来的八个半小时内继续扩大。