首先，将麻醉的小鼠放在手术台上。使用连接到加热垫的直肠探头保持体温。从耳朵到眼睛之间的区域，沿矢状缝线的方向在头部皮肤上做一个切口。
缩回皮肤并去除颅骨右侧的骨膜。然后找到坐标，距前切面 2.5 毫米。将氰基丙烯酸酯涂在多普勒支架上并连接起来进行激光多普勒流量测量。
胶水干燥后，连接多普勒探头。然后，检查用于评估脑血流的正确信号读数。要进行动脉闭塞，请将鼠标翻转到仰卧位，并用医用胶带将其固定在手术台上。
然后在脖子上做一个中线切口。横向拉动皮肤，然后使用牵开器拉开唾液腺。这暴露了颈动脉区域。
确定颈总动脉（CCA）、ICA和ECA的血管解剖结构，以及由它们衍生的不同动脉。为了便于处理，从结缔组织中分离 CCA，然后分离 ECA。然后烧灼甲状腺上动脉，将ICA从结缔组织中分离出来。
再次检查以确保主动脉与结缔组织完全分离。接下来，在上颌舌分叉处将 6-0 丝缝合线缠绕在 ECA 周围。然后在 CCA 周围缝合。
放置一个血管夹，中断 ICA 的血液循环。在 ECA 上做一个小切口，靠近紧结所在的区域。插入单丝，直到厚涂层完全进入动脉腔。
拧紧第二个结，将单丝固定在动脉内，并防止血液施加的压力将其推出。将 ECA 切到第一个结下方并旋转树桩以使其朝向 ICA 方向。通过 ICA 推进单丝，直到 MCA 分支点。
闭塞反映在LDF读数中的血流量突然下降。40分钟后，再次麻醉小鼠并将其放回手术台上。取下脖子上的缝线。
闭塞 45 分钟后，松开将单丝固定到位的结。缓慢而轻柔地拉动细丝，检查是否发生了组织再通。然后拔出灯丝并拧紧结以防止失血，清洁血液并解开CCA结。
确保动脉壁没有损伤。取下牵开器并重新定位肌肉、腺体和皮肤。使用 6-0 缝合线缝合皮肤并涂抹消毒剂。
断开多普勒探头并拆下支架。最后，缝合和消毒头部皮肤。使用体内 MRI 神经成像评估瞬时大脑中动脉闭塞手术的结果。
再灌注后在不同时间点评估的病变演变表明，病变体积的进展大约需要两天才能完成。行为测试，如握力测试，显示小鼠在短暂性大脑中动脉闭塞24小时后力量丧失。此外，在角落试验的刺激下，小鼠表现出转向右侧的偏好，该右侧与病变同侧，表明右侧大脑中动脉闭塞成功。
