首先将所有收集到的夜蛾科昆虫从网袋转移到网笼中。接下来,提供一个含有灭菌的 10% 蜂蜜水溶液的培养皿。将笼子设置在稳定的环境中。
选择当天冒险进入笼子的野生型雌性昆虫。小心地将这些昆虫转移到单独的小瓶管中,确保每个管子都用棉盖密封。对于昆虫解剖,首先将刚瘫痪的雌性昆虫放入含有无水乙醇的解剖培养皿中。
为确保干净的解剖,请用无水酒精浸入昆虫并用清水冲洗。接下来,使用镊子将胸部和腹部交界处的背翅分开。将腹部转移到装满 2 到 5 毫米水的新一次性培养皿中。
使用解剖镊子轻轻剥离腹部外骨骼,从尖嘴背腹到尾巴。在另一侧复制这些步骤,并将其放入清水中以分散完整的组织。现在用镊子轻轻剥离表皮脂肪组织,轻轻拉动并释放卵巢。
用一把解剖镊子,轻轻地从卵巢中去除脂肪颗粒和任何周围器官。从中间逐渐剥离交配囊,消除附着在卵巢管上的脂肪颗粒。从垂直的后端轻轻握住卵巢和交配囊,然后慢慢向下展开。
为防止损伤,将卵巢转移到装满水的新培养皿或干净的培养皿中。握住卵巢尖端,向内展开卵巢。使用颜色和大小指示剂评估昆虫的卵成熟度。
然后根据卵子发育情况判断卵巢等级。解剖后,确保将雌配囊组织与完整的卵巢分开。检查形态,因为交配囊的解剖特征因物种而异。
接下来,通过将卵巢组织分为五个不同的等级来分析卵巢解剖结构。最后,根据实验要求使用数码相机拍摄卵巢图像。观察到卵巢发育的四个不同阶段,包括卵巢发育不全的乳白色透明阶段、卵黄沉积阶段(卵子稍大、卵子稍不成熟)、成熟阶段(亮黄色珠状卵)和卵粒很少或没有卵粒的末期产卵阶段。
野生型昆虫Helicoverpa armigera的交配囊具有柱状右螺旋和内腔。Mythimna separata 有一个带有深棕色条纹的 G 形交配囊。Agrotis ipsilon 的交配囊呈线形,外背部囊肿呈大线圈。
Spaelotis valida 有一个略带褐色的薄 J 形交配囊,而 Spodoptera exigua 则显示出一个白色半透明的哑铃形囊,中间有一个气泡囊肿。草地贪夜蛾的交配囊是红色的,上部有一个乳白色透明的嘴和一个隐约可见的内部囊性腔。Pseudoptera lepigone 交配囊很小,盘绕着封闭的外囊肿。
Mamestra brassicae 具有橄榄色的双盘囊,带有外囊肿。旧蠕虫卵巢分级显示卵巢导管透明且有弹性,卵母细胞一级可见。在二年级时,卵巢导管变得透明,有嫩黄色的卵子。
在三年级时,没有大脂肪体,产卵管处的导管最厚。四年级和五年级的卵巢中出现簇状和较少的卵子,呈淡黄色和绿色。在粘虫、塔罗牌毛虫和棉铃虫中也观察到所有五个卵巢等级。