首先,切割福尔马林固定的石蜡包埋或FFPE DNA和RNA样品。打开自动纯化或 API 仪器,然后使用用户名和密码登录。接下来,在Integrated Genomic Viewer软件的样本下,点击创建样本“输入样本名称,选择应用类别。
输入样品详细信息后,单击“保存”然后选择运行“然后单击”样品到结果“并输入运行名称,然后单击”下一步“选择检测,然后单击感兴趣的样品,然后单击下一步”选择每个样品后,单击分配“然后检查洗脱参数并保存运行。放置FFPE组织样品和样品处理管。将试管以2, 000 G离心一分钟。
将核酸纯化试剂盒制备的蛋白酶酶消化液预混液加入试管中。将样品在 60 摄氏度下孵育一小时,然后在 90 摄氏度下孵育一小时。冷却样品后,提起样品处理管的内管并向左转将其锁定。
将内管以2, 000G离心10分钟。然后向右转并将其与另一根管子分开,以解锁管子。丢弃内管并将外管放在冰上,直到加载到 API 上。
制备 DNA 酶切预混液,并加载到预填充的 FFPE DNA 和 RNA 纯化板 2 中。将制备的样品加载到FFPE DNA和RNA纯化板一中。在 API 屏幕上,单击“运行”,然后选择运行计划并单击“下一步”按照屏幕上的说明加载纯化运行所需的耗材和试剂。
加载完所有试剂后,单击“下一步”关闭 API 门并单击“开始”运行结束,单击“卸载”并立即取出含有纯化 DNA 和 RNA 的 48 孔核酸存档板。样品纯化结束后,密封板,在零下80摄氏度下储存。