首先,收集tub-Gal4杂交系的处女果蝇和UAS-cac-RNAi系的雄性果蝇。将处女苍蝇和雄性苍蝇转移到同一个小瓶中以收获后代。闭塞三到五天后,用刷子收集后代和tub-GL4 UAS-cac-RNA苍蝇。
在测试前一天,将苍蝇转移到装有食物的新干净小瓶中。接下来,小心地将四到六只二氧化碳麻醉的苍蝇放入单独的新鲜小瓶中。将相机放在白板前的三脚架上。
使用空小瓶手动调整相机的焦距。现在,将装有苍蝇的小瓶以最高设置涡旋 10 秒钟。立即将小瓶放在白板上,观察苍蝇是否有任何类似癫痫发作的行为。
将恢复时间测量为苍蝇恢复直立能力所需的时间。与野生型果蝇相比,cac敲除果蝇表现出明显更高的癫痫样行为发生率。击倒果蝇在1秒内的恢复率明显低于野生型果蝇。