Micro-Colony Forming Unit Assay to Quantify Mycobacteria

要使用孔板进行连续稀释，首先将分枝杆菌悬浮液放在 96 孔板的 A 排和 E 排上。将 180 微升去离子水加入剩余的孔中，进行连续稀释过程。使用12通道移液器，将悬浮液重悬于A行中，并将20微升转移到B行中，重复B排和C行的悬浮液转移，直到D行达到最后的稀释度。

让液滴轻轻接触琼脂，确保正确转移并最大限度地减少尖端内的液体滞留。让液滴干燥并关闭琼脂平板。在 37 摄氏度下孵育，同时监测细菌生长。

或者，将琼脂平板放入密封的塑料袋中以防止干燥。孵育 6 至 10 天后，检查肉眼可见的单个菌落。使用最低放大倍率物镜将板置于倒置显微镜下。

或者，使用相机拍摄液滴的照片，并使用 ImageJ 在计算机上手动计数菌落进行自动菌落计数。使用微菌落形成单元或微量CFU测定从少量琼脂平板中产生大量数据。使用脂质体进行沙奎那韦递送可提高对具有不同耐药性的微杆菌菌株的治疗效果。