荧光反射成像用于定量小鼠关节中蛋白酶活性

首先，将麻醉的小鼠仰卧在成像系统中，鼻子放在鼻锥中。放置鼠标，使小腿伸展，膝盖略微指向空中。在成像系统计算机上打开兼容的软件。

在采集控制面板中，单击初始化以预热系统，然后等待温度指示灯变为绿色。然后单击“映像向导”。单击滤光片对后，确保设置已配置为落射照明。

然后按下一步。从下拉列表中，找到感兴趣的探头以选择正确的激发和发射设置，然后单击下一步。选择鼠标作为成像对象。

在曝光参数中，确保选中自动设置并选择荧光和照片选项。在视野清单中，选择 D 到 22.6 厘米，然后按下一步。确认所有设置正确后，按采集序列按钮，并确认图像曝光充分。

要分析图像，请在黑白图像的每个膝关节上放置一个大小一致的感兴趣区域圆圈。计算每个膝关节的总辐射效率和平均辐射效率。如果还计算了对侧腿的辐射效率，则通过将受伤腿的辐射效率测量值除以对侧腿的辐射效率测量值来归一化数据。

荧光反射成像显示，与未受伤的小鼠相比，小鼠受伤关节中的蛋白酶活性显着更高。与对侧关节相比，受伤的关节的平均辐射效率高出43%，而未受伤的小鼠的关节则高出43%。在受伤后两周，与对侧关节相比，在受伤的关节中观察到辐射效率高出 30% 至 80%。

相比之下，与对侧关节相比，手术手术关节在第四周的辐射效率高出 300%，这表明手术具有显着的混杂效应。