Cryopreservation of Primordial Germ Cells Collected from Drosophila Donor Embryos

继续进行原始生殖细胞或PGC的冷冻保存。将供体胚胎的PGC收集并沉积在胚胎表面后。用冷冻保护剂或 CPA 清洗移植针头，然后将新鲜的 CPA 装入针头中。

将加载的 CPA 添加到沉积在胚胎上的 PGC 中，同时确保 CPA 的体积与 PGC 的体积相同。 添加 CPA 后一到两秒，从 PGC 簇中去除多余的 CPA。接下来，清空针头并用硅油装入五秒钟或更长时间。

将所有收集的 PGC 加载到针中，然后再次加载硅油 5 秒钟或更长时间。确保 PGC 夹在两层硅油之间。使用软薄纸将针头从显微操纵器上拆下，吸干针头上的油，不要将针尖与纸巾接触。

将针头连接到针架上，并使用乙烯基胶带将其锁定在底部的位置。将针头朝下，将其浸入液氮中，快速冷冻支架。在液体停止从架子中嘶嘶作响之前，不要松开支架。

将支架存放在液相区域的液氮储罐中。