Thawing and Transplantation of Cryopreserved Primordial Germ Cells for Drosophila Strain Revival

首先，将第五阶段卵模拟果蝇宿主胚胎对准移植载玻片。在将后部向右和腹侧向顶部的同时，在 20 分钟内将大约 30 个胚胎排成两排。通过在室温下将针头朝下浸入 EBR 溶液中，将针头浸入针头中解冻冻存的 PGC。

将其浸入水中 10 秒钟。将移植载玻片放在显微镜载物台上。将冻融的针头连接到毛细管支架上，并将第一个胚胎带入左排，将针尖带入同一焦平面。

使用20倍物镜，将针尖轻轻放置在胚胎后端的表面。轻轻地戳每个胚胎的外部，并确认它们慢慢恢复到原来的形状。用针从后极穿透胚胎。

轻轻地将大约 10 到 20 个 PGC 沉积在后极内，特别是在卵黄膜和体细胞层之间，并将针从胚胎中缩回，然后对后续胚胎重复相同的操作。最后，为了恢复菌株，将新出现的雌性和雄性杂交。