Trichogramma dendrolimi Artificial Host Interaction and Venom Extraction

首先，取一层长 16 厘米、宽 12 厘米、厚 20 微米的聚乙烯塑料薄膜。使用玻璃研磨工具在标准的 96 孔 PCR 布局中压出 30 个半圆形突起。将压制的聚乙烯塑料薄膜的两面暴露在紫外线下一小时进行消毒。

在半圆形表面上加入少量10%聚乙烯醇。接下来，将大约 3， 000 只麻醉的雌性毛滴虫黄蜂放入收集箱中。将薄膜蛋卡的凸面朝向收集盒，并用橡皮筋固定边缘。

现在向每个突起处加入四微升氨基酸溶液。然后用另一片聚乙烯塑料薄膜覆盖它。用橡皮筋用两张塑料片紧紧地盖住收集箱。

让黄蜂自由寄生四到八个小时。在寄生过程中通过湿棉提供 10% 的蔗糖水。接下来，从人造蛋卡的内部突起处获得寄生的氨基酸溶液，并将其转移到1.45毫升管的盖子上。

用直径为 10 毫米的 25 微米尼龙网盖住管盖。然后将尼龙网轻轻固定在管中。将右上角的试管以 1， 360 g 离心 10 秒。

收集含有毒液的过滤溶液。将毒液储存在零下 80 摄氏度以供进一步分析。BCA对毒液样本的分析表明，毒液蛋白的浓度范围为每微升0.35至0.46微克。

氨基酸溶液的阴性对照的蛋白质浓度仅为 0.03 至 0.05 微克/微升。对毒液的SDS-PAGE分析显示，蛋白质的大小范围从10千道尔顿以下到130千道尔顿以上不等。