FACS Enrichment of Zebrafish Gut Cell Suspension for scRNAseq

为了对从斑马鱼幼虫中分离的肠道细胞进行荧光激活细胞分选或FACS，使用野生型全幼虫样品通过在流式细胞仪上记录3， 000个细胞来设置分选细胞群的门。使用 100 微米喷嘴并将“分选精度”设置为“4 向纯度”。将含有 200 微升 PBS 和 5% 胎牛血清的收集管放入传真机中。

加载从分离的肠道制备的细胞悬液，并在排除死细胞中的双峰后，将活的或DAPI阴性的单细胞分选到收集管中。细胞分选后将收集管保持在冰上，用台盼蓝进行活力检查。用血细胞计数器计算悬浮液中的细胞数。

这些细胞现在可以进行单细胞RNA测序处理。每个样品使用大约 20， 000 个细胞。