非体外循环冠状动脉旁路移植手术制备慢性心肌缺血猪模型

首先，将麻醉和插管的动物放在其背部并用无菌毛巾盖住它。使用单极电烙术做一个 20 厘米的切口，从胸骨切迹近端向下延伸到剑突远端，并切开肌肉层、皮下脂肪和结缔组织直至胸骨。然后使用摆动锯进行中等胸骨切开术。

为了有效地观察纵隔，请使用专门的胸牵开器。使用单极电烙术或 Metzenbaum 剪刀解剖粘连。然后通过解剖胸骨旁肌肉和脂肪来暴露LIMA。

接下来，通过抬高胸骨左缘开始解剖 LIMA，以确保最佳可视化。轻柔地牵引外膜，暴露LIMA的动脉和静脉分支。使用电烙尖端进行钝解剖，小心地将其与胸壁分开。

在树枝上使用血夹并烧灼这些树枝的胸壁侧。然后夹住 LIMA 的远端，就在分叉点之前并分开导管。用自由绑扎的 2-O 丝绸缝合线固定远端。

在准备近端进行移植后，通过让移植物短暂出血来手动评估流动质量。现在用无创伤的斗牛犬夹夹住 LIMA 导管的远端以防止出血。使用硅胶回缩胶带和固定在胸骨牵开器上的组织稳定器稳定左前降支或 LAD 动脉。

使用 11 刀片在狭窄远端的 LAD 动脉中进行动脉切开术，并用虹膜剪刀将其伸展。在LAD动脉中放置适当大小的冠状动脉分流器。使用 7-O 运行、不可吸收的缝合线在非泵旁路技术中进行 LIMA 到 LAD 吻合。

取一个三毫米的外泌体悬浮液，并使用配备有18号针头的五毫升注射器进行混合。然后逐渐将 1.5 毫升该悬浮液移液到两个可吸收的胶原蛋白海绵上，放入中等大小的培养皿中。为了靶向心脏的冬眠区域，将外泌体海绵倒置在LAD动脉分布中隔前区的心外膜上。

小心地排列两块海绵，以完全覆盖冬眠区域。在每块胶原海绵上使用聚乳蛋白网片以确保适当的覆盖，并用精细的 7-O 间断缝合线将网片缝在心外膜上。在胸骨切开切口的下侧附近做一个单独的刺切口，并小心地将胸管放在心脏的前侧。

使用不可吸收的缝合线近似胸骨，采用八字形图案。按照标准程序分别使用 2-O 和 3-O 可吸收缝合线闭合肌肉和皮肤层。用胸管排空胸腔后，使用钱包线缝合伤口。

伤口闭合后，拔出胸管。在休息时，比较四个动物组的峰值充盈率与舒张末期容积的关系。在低剂量多巴酚丁胺输注中，冬眠心肌组的峰值充盈率降低。

冠状动脉搭桥手术组有改善，冠状动脉搭桥手术组加间充质干细胞组有显著增加。MRI分析显示，冠状动脉旁路移植术加间充质干细胞组不会改变静息时的区域收缩功能。然而，在压力下，与冠状动脉旁路移植术相比，该组的区域收缩功能显着改善。