首先,在室温下用每平方厘米5微克的纤连蛋白涂覆组装的可重构细胞培养平台的膜一小时,以改善细胞附着。然后,使用p200移液管吸出涂层溶液。将图案模板很好地放入核心模块中。
将细胞介质添加到设备的孔和底部通道。将人脐静脉内皮细胞接种到孔中。将设备放入培养皿中。
在培养皿中加入含有去离子水的 15 毫升锥形管盖以保持局部湿度。将培养皿装置转移到培养箱中。要在流动下培养细胞,请继续将平台从开孔模式重新配置为微流控模式。
为此,用内皮细胞生长培养基填充储液器和管。将下壳体放在样品台上。将开孔核心模块插入下部外壳,然后取下模板,从模块的孔中吸出细胞介质,然后将流动模块放入孔中。
接下来,将上壳体将流量模块密封在核心模块井中。将入口和出口点胶吸头连接到流量模块端口。启动蠕动泵,将流体流引入系统。
当达到所需的纯粹流量暴露时间时停止泵。拆下入口和出口点胶头,然后拆下上壳体。用镊子轻轻地从孔中取出流量模块。
最后,在进行所需测定之前,向孔中加入 100 μL 细胞培养基。在流动下培养的细胞沿流动方向排列,而无流动培养的细胞保持随机定向。细胞暴露于纯粹的压力导致Kruppel样因子2和内皮一氧化氮合酶的上调,它们在健康血管中起着关键作用。