首先,在土壤中种植拟南芥种子。将它们生长在带有白色荧光灯的房间中。接下来,接种丁香假单胞菌pv的单个菌落。
番茄 DC3000 在 5 毫升 King's B 液体培养基中。在28摄氏度下孵育培养物,以每分钟200转的速度振荡,直到培养物达到对数生长后期。将培养物在6,000G下离心两分钟。
然后将细菌沉淀重悬于一毫升无菌水中。接下来,移出上清液。并将沉淀重悬于一毫升气孔开口缓冲液中。
测量悬浮液在 600 纳米处的光密度。用含有0.4%硅表面活性剂的气孔开口缓冲液将细菌悬浮液稀释至光密度为0.2。要接种细菌悬浮液,首先,将拟南芥植物放在覆盖有透明盖子的托盘上,在光线下至少三个小时。
取下盖子。然后用喷枪用细菌悬浮液喷洒叶子的底面。接种后,将植物在覆盖有透明盖子的托盘上孵育,以保持约85%的相对湿度