Gen5 软件中的图像分析，使用多路活细胞成像分析患者来源的类器官中的药物反应

首先，使用 Cytation 5 活细胞成像系统对荧光标记的 PDO 进行成像。然后，启动 Gen5 软件。导航到“实验”，然后单击“任务管理器”中的“打开”。

打开所需的实验，然后选择“平板”，然后在工具栏中选择“查看”。然后，将数据下拉菜单切换到 Z 投影。双击所选孔。

选择“分析”。点击，我想设置一个新的图像分析数据缩减步骤，点击 OK.In 分析设置，将类型设置为蜂窝分析，将检测通道设置为Z投影转换的TSF明场。单击“选项”以打开主掩码和计数页面。

在阈值框中选中自动，然后单击“确定”关闭弹出窗口。在“对象选择”（Object Selection） 下，定义最小和最大对象大小以过滤掉细胞碎片或单个细胞，然后根据需要选择其他要素。接下来，单击“应用”，掩码对象将突出显示。

要在细胞分析工具栏中设置子群体分析，请单击计算指标。然后，单击右下角的“选择或创建感兴趣的对象级指标”。从可用的对象指标中，选择所需的指标，例如循环度，然后单击插入。

单击“确定”进行确认。接下来，在细胞分析工具栏中选择亚群分析，然后单击添加以创建新的亚群。输入子群体的名称。

在对象指标中，单击添加条件以添加所选指标。在“编辑条件”窗口中输入所需的参数，然后单击“确定”。在窗口底部的表格中选择所需的结果，然后单击“确定”，然后单击“应用”。在“对象详细信息”（Object Details） 下，选择要查看遮罩的指定子群体。

如果满意，请单击“细胞分析”窗口中的“确定”，然后单击“添加步骤”将分析应用于所有孔。