用于心脏发育研究的斑马鱼幼虫制备、安装和光片成像

首先，打开体视显微镜记录斑马鱼幼虫在受精后0至7天之间的发育。制备0.8%低熔点琼脂糖和每升150毫克三卡因。将琼脂糖冷却至室温后，使用移液管将麻醉的斑马鱼移至琼脂糖中。

使用另一个转移移液管，将装有琼脂糖的鱼安装在氟化乙丙烯管中。将装有斑马鱼幼虫的管子连接到六轴电动光片显微镜样品台上。将试管浸入装有 E3 水的样品室中。

从腹侧旋转斑马鱼幼虫，以便更好地观察心脏。将电动样品台连接到工作站。并配置所有必要的参数，包括所需的移动模式。

在CMOS相机和工作站之间建立连接。将步长设置为 1 微米，将总帧数设置为 300，将曝光时间设置为 5 毫秒。然后，定义所需的感兴趣区域。

打开激光器并启动幼虫的光片显微镜成像。将 300 帧记录为 2D 图像序列，以涵盖幼虫的三到五个心动周期。记录新样品切片的另一个图像序列，直到覆盖整个心脏。