首先将 HEK-293T ACE2 TMPRSS2细胞维持在 T75 烧瓶中，DMEM 中含有加热的活化 FBS、青霉素和链霉素。对于细胞计数，将 20 μL 细胞悬液与 20 μL 台盼蓝溶液混合。向细胞计数室中加入 20 微升染料混合细胞悬浮液，并计数每毫升的细胞数。
将 2.5 乘以 10 倍于 4 个 HEK-293T ACE2 TMPRSS2 细胞的 50 μL 完全 DMEM 培养基中接种到 96 孔板的每个孔中。将细胞在二氧化碳培养箱中在37摄氏度下孵育过夜。第二天，用50微升病毒悬浮液代替50微升DMEM，并在37摄氏度下孵育18小时。
孵育后，向每个孔中加入 7.5 μL 细胞裂解缓冲液，并在轨道振荡器上混合 2 分钟。细胞裂解后，加入新鲜制备的萤火虫荧光素酶测定溶液，并将它们在轨道振荡器上混合一分钟。使用商业荧光素酶
对于中和抗体测定，如前所述，将 HEK-293T 细胞接种在 50 μL 完全 DMEM 中。在 96 孔板中，加入 8 μL 27 BV 中和抗体，并用 6 μL 无血清 DMEM 进行连续稀释。将 54 μL Ha-CoV-2 病毒颗粒加入到连续稀释的抗体中，并混合悬浮液。
在 37 摄氏度的 5% 二氧化碳中孵育一小时。然后向含有HEK-293T细胞的孔中加入50微升病毒悬浮液。对于对照，将 50 μL 完全 DMEM 培养基加入仅含有 HEK-293T 细胞的孔中。
将板放入37摄氏度的培养箱中18小时。如前所述裂解细胞后，加入新鲜制备的萤火虫荧光素酶测定溶液，并通过轨道振荡混合一分钟。使用商业荧光素酶
Ha-CoV-2 Omicron 和 Omicron 变体产生的信号比野生型 Ha-CoV-2 高 4 到 10 倍，表明传染性更高。抗体 27 BV 对 Delta 和 Omicron 变体均具有中和活性。27 BV 对 Omicron 的 ID50 的效力比野生型和 Delta 的 ID50 低约 10 倍。
