设置一个安静的房间,温度控制在 21 摄氏度,光照周期为 12 小时,黑暗周期为 12 小时。轻轻地将每只小鼠放入由 PMMA 制成的腔室中,该腔室放置在 5 平方毫米网眼地板支架上。让小鼠适应30分钟,然后评估基线和实验机械阈值。
然后将网状地板支架调整到舒适的高度,以便可以从各个方面评估小鼠,并且它们的腹部和所有四只爪子都可以通过网状地板开口轻松触及。用吸收性材料覆盖腔室下方的表面,以控制排尿和排便。使用 EVF 设备时,确保腔室下方有足够的臂空间。
在设置用于机械阈值评估的EVF装置后,通过将小鼠腹部分成三个虚拟部分来进行腹部测量。为了获得基线测量值,在感染前48小时,将小鼠置于腔室中,并在设置EVF装置后半小时,通过用双手逐渐升高探针来刺激指定的组织。现在,逐渐对组织施加压力,直到小鼠表现出伤害性行为。
要评估右后爪,请注意缩回、舔爪子或四爪跳跃等动作。对于内脏评估,观察腹部突然回缩、立即舔舐或抓挠被探测区域,或四爪跳跃。然后将记录的值与 EVF 程序一起保存到指定的电子设备中,或将其记录在笔记本中。
将显示重置为零。在相邻腔室中探测每只小鼠五次,计算它们的个体平均值,并在24小时后重新评估基线测量值。