首先,打开质量光度计并让它运行一小时,然后再开始任何测量。打开电源并接合隔离按钮以激活防振台。随后,打开空气压缩机以激活 MicrofluidX 盒子。
然后启动数据采集软件,然后启动MicrofluidX控制软件。要加载样品和钙化剂,请将钙化剂离心管放置在 MicrofluidX 盒内的第 4 个插槽中,将样品离心管放置在第 5 个插槽中。将清洁溶液 CS1、CS2 和 CS3 分别放在 MicrofluidX 盒中的位置 1、2 和 3。
将连接缓冲管线的盖子连接到 pH 7.4 的 200 毫升缓冲瓶上。然后将 MicrofluidX 芯片放在制备板上。将 S 流量单元传感器的另一端连接到 MicrofluidX 芯片上第一个通道的样品入口,完成样品管线。
将 L 流量单位传感器的另一端插入 MicrofluidX 芯片上第一个通道的缓冲液入口,最终确定缓冲线。为了收集流出物,将一根管子连接到 MicrofluidX 芯片上第一个通道的出口,并将另一端放入废液容器、烧瓶或烧杯中。将少量显微镜浸油涂在质量光度计的物镜上。
将 MicrofluidX 芯片放在质量光度计的支架上,确保样品入口朝上,并使用载物台夹将其固定。使用数据采集软件调整载物台,将通道一的观察区域与光度计的物镜对齐。然后合上质量光度计的盖子,激活数据采集软件中的液滴稀释查找焦点功能。
检查软件界面左下角的白色对焦环。如果存在表明浸油中有气泡的间隙,请将载物台速度提高到最大,并轻轻地将载物台左右移动以消除它们。按下记录按钮开始一分钟的测量,确保在测量过程中不存在杂质。
从pH 7.4的200毫升缓冲瓶中取下盖子,并将其连接到pH 5.0的200毫升缓冲瓶上。如前所述,将 MicrofluidX 芯片放在制备板上,并使用 MicrofluidX 芯片上的第二个通道而不是第一个通道进行流出收集。在 MicrofluidX 控制软件中,将 M 开关更改为位置 5。
将样品管路流速设置为每分钟 8 微升,并确保样品管路中的压力保持在 350 毫巴以下。计算流速时,应将低流速下的全部差值与所需的样品稀释因子相匹配。实验结束后,按照清洁规程保持管路的清洁度。