癌症组织切片的多重环状荧光免疫组织化学染色

首先，获得先前准备好的包含癌症组织切片的载玻片。制备一抗的工作混合物。将抗体复合物加入载玻片切片，并在室温下孵育一小时。

然后用 0.1%吐温 PBS 洗涤载玻片 3 次，持续 5 分钟。制备荧光二抗混合物。将其滴落在载玻片上，并在室温下孵育一小时。

然后在室温下进行第二轮一抗孵育一小时。用 0.1%吐温 PBS 清洗载玻片 3 次，每次 5 分钟。并使用滤纸从组织周边去除多余的水。

同样，如前所述，进行第二轮二抗孵育和洗涤。现在，将高锰酸钾试剂添加到组织中。一分钟后，用流水冲洗五分钟。

用酒精浓度增加进行脱水。最后，添加DAPI以完全覆盖组织切片，并放置盖玻片进行多光谱成像。多重免疫荧光成像显示肺癌脑转移组织中存在 CD 3 阳性、CD 8 阳性、CD 20 阳性细胞。