在马铃薯葡萄糖螺旋钻斜面上培养产黄曲霉 NRRL 3357 后，在 30 摄氏度下培养 6 天后，用 10 毫升含有吐温 20 的水洗脱试管中的真菌孢子。涡旋试管 20 秒。通过放置在漏斗中的玻璃棉过滤真菌孢子悬浮液，并使用涡旋滤液稀释。
用 9.9 毫升水稀释 100 微升过滤后的悬浮液等分试样。涡旋后，用血细胞计数器计数孢子。使用屏幕上的公式，计算将一体积的原始悬浮液从斜面稀释到每微升 1000 个孢子所需的水体积。
将一体积的原始悬浮液添加到计算的水量中。接下来，轻轻地敲碎花生荚并取出外壳。将种子放入无菌烧杯中。
加入 0.05% 过氧化氢溶液，直到烧杯装满 70%，让种子吸水 3 小时。从种子中倒出过氧化氢溶液，并加入大约三倍量的 80% 乙醇水混合物以覆盖种子。孵育 1 分钟。
然后用等体积的无菌蒸馏水冲洗种子两次。将 5 倍体积的 3% 过氧化氢溶液加入烧杯中，静置 5 分钟。倾析过氧化氢溶液后，用等体积的无菌水冲洗种子两次。
将直径为 90 毫米的滤纸放入盖子中，并用 1 毫升无菌水润湿滤纸。盖上盘子。将种子放在无菌纸巾上。
使用镊子去除种子的皮肤。立即将去皮的种子放入培养皿中，以避免脱水。切下包含胚轴的种子的约三分之一。
将种子劈成子叶，并使用锋利的钻头在每个子叶的外侧中间钻约 1.5 至 2 毫米深。将 4 到 6 颗钻孔的种子放在 1.5% 的螺旋培养皿上。使用 10 微升移液器，将两微升孢子悬浮液添加到每个半子叶块的钻孔腔中。
盖上盖子后，在 30 摄氏度无光下孵育 72 小时。
