首先,将病毒载体储备瓶在冰上解冻 20 分钟,并在 100 微升 DPBS 中稀释 AAV 颗粒。用 28 至 30 号针头将稀释的 AAV 溶液装入 1 毫升注射器中,避免气泡。将麻醉的小鼠固定在尾部照明器限制器中。
并使用纱布垫用防腐剂清洁注射部位。用两根手指按摩尾巴,直到观察到静脉。然后将载体以低角度注射到尾静脉中,并拔出针头。
立即用手指对注射部位施加压力以止血。为了制备泊洛沙姆 407,将其溶解在 DPBS 中,在生物安全柜中以 4 摄氏度的温度在旋转器上过夜。接下来,将鼠标手动固定在通风橱下,将其头部和身体向下放置。
用消毒剂清洁腹部左下腹外侧到中线外侧的注射部位。要注射 P407,请将针头以 45 度或更小的角度插入腹膜腔。在诱导高脂血症 4 周后,超声心动图显示心力衰竭伴射血分数保留,因为心室内舒张时间延长。
观察到早期二尖瓣稀薄流速与二尖瓣环早期舒张速度之比增加,同时早期至晚期舒张期经二尖瓣流速降低。