用分化的人阴道上皮细胞细菌接种器官芯片在微需氧条件下研究活的阴道微生物组

首先，将每种细菌菌株的计算量混合，使每毫升总共达到约 500 万个菌落形成单位。将混合物以 7， 000 G 在 4 摄氏度下离心 7 分钟。接下来，小心地用移液液出上清液。

将沉淀重新悬浮在缓冲能力和葡萄糖含量低的 Hank 平衡盐溶液中。现在，从豆荚中分离出含有分化的人阴道上皮细胞的器官芯片。用移液器吸头塞住芯片基底通道的出口。

将 200 μL 无抗生素分化培养基加入基底通道入口，而不向下推移液器柱塞。从移液器中松开移液器吸头，让培养基自由流过通道。接下来，将 37 微升的细菌接种物移液到芯片的顶端通道入口，同时从出口吸出。

拉动尖端。然后，用移液器吸头插入顶端通道入口和出口。对于对照芯片，将 37 微升缓冲容量低和葡萄糖的 Hank 平衡盐溶液移液到顶端通道入口。

吸出芯片表面的任何介质后，将芯片放入 150 毫米培养皿中。在接种后 48 小时内检测到 L.crispatus 和 G.vaginalis 的菌落，证实健康和生态失调细菌都植入了阴道芯片中。接种了 L.crispatus 的阴道芯片的 pH 值与未接种的对照芯片的 pH 值相似，当与 G.vaginalis 共培养时，它们的 pH 值显着升高。