mOrange-Nano 募集到 disiLID 功能化巨型单层囊泡 （GUV） 以生成蛋白质模式

首先，取一管新鲜收获的 GUV。加入链霉亲和素溶液，在室温下静置 30 分钟。然后向 GUV 溶液中加入一微摩尔的 b-disiLID。

用铝箔覆盖样品并将其置于黑暗中。用 150 微升 BSA 溶液预处理微载玻片 18 孔玻璃底室 10 分钟。然后取出 BSA 溶液并用 150 微升水清洗孔 3 次。

接下来，在缓冲液中加入 145 微升 200 纳摩尔 mOrange-nano 溶液。向溶液中加入 5 微升用 b-disiLID 修饰的 GUV。用铝箔覆盖样品，等待大约 15 分钟让囊泡沉降。

然后，将微载玻片置于共聚焦显微镜下。在 552 纳米处激发样品以进行 mOrange 可视化。在 GUV 膜中的 DID 为 638 纳米。

mOrange-nano GUVs在黑暗中未能表现出荧光。在 GUV 膜上量化的 mOrange 强度显示蛋白质募集快速有效，且具有完全可逆性。