首先,将荧光标记的纤维蛋白原添加到 3 毫升柠檬酸人全血中,以达到每毫升 60 微克的最终浓度。在 37 摄氏度的水浴中用直径为 120 毫米的滚筒设置 Chandler Loop。切开一个标准的200微升PCR管,并连接管子的末端。
为了启动血液凝固,将 176 微升 200 毫摩尔氯化钙加入 3 毫升全血中。在轻轻倒置的情况下,使用三毫升注射器适当混合后,将血液装入管中。立即将管道放在 Chandler Loop 滚筒上,连接两端。
在弱光条件下,以 40 RPM 的速度旋转部分浸没在水浴中的滚筒。40 到 60 分钟后,从管道中取出凝块。Gross Chandler Loop FITC纤维蛋白原标记的全血特性在紫外光下显示出均匀的荧光色散。
此外,改变全血中FITC纤维蛋白原的程度不会改变凝块重量。