首先,将装有 25 毫升准备好的冷高级 DMEM/F-12 培养基的试管放在冰上。将解冻的基质添加到每个试管中。将悬浮液混合在一起,确保不会形成团块。
现在将 250 微升稀释的基质移液到 24 孔板的每个孔中。倾斜板以均匀地铺开涂层溶液。孵育后,使用血清移液管轻轻去除多余的溶液,而不会刮伤涂层表面。
立即将 250 微升温热的完全干细胞培养基移液到每个孔中。要用 Matrix 4 无 Xenol 水凝胶涂覆组织培养板,首先将水凝胶加热至室温。将两体积的水凝胶加入含有一体积的3x干细胞培养基的试管中。
将溶液上下移液以充分混合。将 250 微升水凝胶转移到 24 孔组织培养板的孔中。然后倾斜板以均匀地铺开水凝胶。
10 到 15 分钟后,包被板现在就可以用于培养诱导多能干细胞了。