用三唑类农药处理胡萝卜愈伤组织以评估农药代谢物的细胞毒性

首先在无菌条件下用不同的三唑类杀虫剂处理收集的胡萝卜愈伤组织。为此，在单独的玻璃瓶中，将 3 克胡萝卜愈伤组织与 10 毫升在 MS 培养基中制备的每种农药溶液混合。此外，在另一个玻璃瓶中将 3 克胡萝卜愈伤组织与 10 毫升无菌 MS 培养基混合。

将准备好的胡萝卜愈伤组织样品在 130 rpm 和 26 摄氏度下在黑暗中孵育 72 小时。将所有处理一式三份。孵育后，使用 0.5 微米玻璃纤维过滤器，通过过滤从培养基中收集胡萝卜愈伤组织。

用超纯水清洗愈伤组织 3 次。最后，使用 55 摄氏度的冷冻干燥机冷冻干燥愈伤组织，然后使用 70 赫兹的高通量组织研磨机将其均质化 3 分钟。培养基中所有农药的浓度呈指数级下降。

而胡萝卜老茧中的老茧开始增加，在 4 或 8 小时达到峰值，然后逐渐减少。这些结果表明，农药很快就被胡萝卜愈伤组织吸收和转化。胼胝培养系统中农药的时间恢复表明，培养 72 小时后，仅剩下 8.3% 至 11% 的农药，表明大部分农药已转化为代谢物。