从 A549-iRFP 细胞建立 3D 多细胞球体用于肿瘤接种

首先，从人肺腺癌或 A549 iRFP 细胞中建立三维多细胞球体或 MCS。使用 100 微升补充有 0.3% 胶原蛋白的完全生长培养基，将细胞接种在 96 孔超低附着圆底球状微板中。在 4 摄氏度下以 300 G 离心微孔板 7 分钟，以促进 MCS 形成。

离心后，在显微镜下检查球状体形态以确保细胞聚集。每隔一天用新鲜的完全生长培养基替换每个孔中的 100 微升生长培养基。在显微镜下观察时，选择具有圆形和整体光滑边缘的球状体，但具有 5 到 10 个粗糙的芽和适当的直径。

测量 iRFP 荧光以选择荧光信号在平均值一个标准差内的 MCS。