A549-iRFP 细胞衍生多细胞球体肺内接种的小鼠手术

通过皮下注射盐酸丁丙诺啡以减轻疼痛，在适当麻醉的小鼠上开始外科手术。将眼药膏涂抹在眼睛上以防止干燥。将鼠标置于背侧姿势，并用胶带将四肢固定在伸展位置。

使用碘和酒精交替使用棉签对背部皮肤进行消毒，每次至少三次。接下来，使用手术剪刀在动物的左后侧切开一个 0.5 到 1 厘米的切口。小心地使用镊子分离肌肉和脂肪组织，直到可以看到胸壁和肺部运动。

使用移液管，将一种选定的多细胞类固醇或 MCS 从微孔板转移到含有冰冷 PBS 的玻璃培养皿中。将 20 号针头连接到 100 微升玻璃注射器上，并在冰上预冷。然后抽取 20 微升预冷的 PBS 和 Matrigel 混合物。

使用注射器在最小体积的 PBS-Matrigel 混合物中从培养皿中快速吸出一个 MCS，将球体保持在针头的金属部分。轻轻地将针头垂直插入两根肋骨之间至约 3 毫米的深度，然后缓慢注入所有 20 微升含有吸出的 MCS 的混合物。然后小心地取出针头。

在伤口上涂抹三重抗生素软膏。用手术夹密封切口，两周后取下。将动物放在红外线加热垫上，并用实验室湿巾覆盖以保持体温。

监测动物至少 30 到 60 分钟，直到它醒来并正常移动。使用 700 纳米通道的小动物成像系统，每三到四天测量一次来自麻醉小鼠肿瘤异种移植物的 IRFP 荧光信号。以四种姿势测量荧光，左、右、背侧和腹侧。

左侧和腹侧的净荧光强度显示出相似的肿瘤进展趋势，腹侧荧光的增长速度略慢于左侧荧光。