获取先前制备的人胃类器官以进行 pH 分析。首先，通过连接器将参比电极连接到 pH 电极电缆。然后，通过 USB 电缆将微电极连接到放大器，并将放大器连接到带有软件的接地 PC。
将微电极和参比电极放入去离子水中，将两个尖端浸入液体中至少 1 厘米。用所需的校准缓冲液填充 50 mL 锥形管。使用精细的实验室抹布，轻轻吸干保护管和参比电极。
打开软件后，在校准选项卡下，选择 Y-Zoom 框，然后将传感器信号读数设置为毫伏。从 pH 4.01 缓冲液中的电极开始，输入 4.01 作为已知 pH 值。毫伏读数稳定后，选择添加点，然后将两个电极放回去离子水中冲洗。
对 pH 9.21 缓冲液重复该过程后，当信号稳定在 83 毫伏左右时，单击 Add point（添加点）。检查微电极在 pH 4.01 和 9.21 之间是否线性响应，以获得两点校准曲线。小心地将保护套平放在工作台上，然后快速、快速地将保护套拉下，以移除微电极。
将微电极安装在显微操作器上，并布置立体镜和显微操作器，以便微电极可以自由地向培养皿前进。放置包含类器官的培养皿以进行分析。将参比电极轻轻固定到立体镜左侧环形支架上的夹子上。
目视推进微电极的尖端，直到它充分浸没在介质中。信号稳定后，记录培养基的三个 pH 读数。然后，在不接触任何类器官的情况下缓慢地将微电极推进到 ECM 中。
记录至少三个 pH 读数以计算平均值。沿垂直于类器官表面的轴线放置微电极，轻轻地在基底外侧类器官表面做一个小的凹痕，不要穿透它。小心地将微电极推进到类器官中并测量管腔 pH 值。
完成后，继续测量下一个类器官的 pH 值。将要清洁的电极放回其保护管中。用去离子水、乙醇和缓冲液连续冲洗电极。
将参比电极放入装有三摩尔氯化钾溶液的烧杯中。用无菌矿物油回填 2 微升玻璃毛细管，并将其加载到显微操作器控制的纳升自动注射器上。最后，用含有 0.02% 甲基红和 150 毫摩尔盐酸的溶液填充，并用 9.2 纳升溶液进行注射。
同一培养板上 10 个类器官的管腔 pH 值变化很小，测量值始终在 8.16 左右。每种培养物中 5 个不同类器官系的腔内 pH 值是一致的，但在类器官系之间观察到显著差异。类器官管腔 pH 值始终低于 ECM，而 ECM 又低于培养基的 pH 值，这表明管腔 pH 值与生理相关，而不仅仅是由周围培养环境决定。
将甲基红注射到类器官腔中证实其 pH 值大于 6.2，这与微电极测量显示 pH 值接近中性一致。
