首先，将新鲜切除的大鼠心肺块放在冰上的纱布上。解剖主动脉周围多余的脂肪。然后修剪主动脉，留出大约 3 到 5 毫米用于插管。
在肺动脉上做一个 1 到 2 毫米长的切口。将修剪过的心肺阻滞直接放在插管正下方的冰上。接下来，使用流量控制管夹调节来自 Langendorff 侧的主动脉插管的流量。
小心地将主动脉插管到左侧插管上。用黑色夹子夹住它，然后用 2/0 丝缝合线系住。完全打开流量控制管夹以增加来自 Langendorff 灌注的流量。
然后打开后载夹具。开始使用软件监测心脏活动。调整心肺阻滞，使肺部的前表面面向操作者。
用 2/0 丝缝合线系住左肺叶。用 2/0 丝缝合线将剩余的肺叶打结一次。然后旋转心脏，使被绑住的肺朝向后部。
用一把小 vannas 剪刀。修剪左心耳的 2 到 3 毫米部分，在心房中形成一个小开口。小心地将左心耳套管到左套管上。
用黑色夹子夹住它，然后用 2/0 丝缝合线系住。调整心腔水套，使心脏位于心腔中心内。现在将压力传感器打开到空气中。
在软件中选择主动脉压。然后单击 bridge amp，然后单击 zero 和 OK 将压力传感器归零。以 Langendorff 模式灌注心脏 10 分钟。
接下来，将气石从 Langendorff Krebs-Henseleit 缓冲储液罐转移到工作中的 Krebs-Henseleit 缓冲储液罐中。打开来自工作灌注液的三向水龙头。关闭通向主动脉插管的大夹子，打开通向左心耳的液流以切换到工作模式。
在工作模式下灌注心脏 15 分钟。用 50 毫升指定的心脏保存溶液填充心脏停搏室。降低水套并关闭工作模式侧的三向水龙头。
关闭夹子以阻止流向左心房插管流动。然后打开流向主动脉插管的液流。现在从 Langendorff 侧和后载荷上关闭夹具。
从心脏停搏管打开夹子。从压力管路中冲洗 15 毫升心脏停搏液。通过主动脉插管用心脏停搏冲洗心脏并收集冠状动脉流出物。
三分钟后，关闭心脏停搏夹和通向主动脉插管的蓝色小夹。将一个 bulldog 夹放在主动脉插管上，将另一个 Bulldog 夹放在左插管上。断开心脏套管阻滞与电路的连接，并将其放入装有心脏停搏的烧杯中，并放入冰柜中。
要在静态冷藏后对心脏进行再灌注，请在冷藏后小心地将心肺阻滞固定在灌注回路上。使用装满 Krebs-Henseleit 缓冲液的钝端 18 号注射器去除套管中的任何空气。首先连接主动脉插管。
然后打开 Langendorff 侧的管路夹。重新连接左套管并确保在将套管连接到灌注回路之前已从套管中去除空气。保持工作侧夹具关闭，直到需要从 Langendorff 切换到工作模式。
每分钟 14 至 22 毫升的主动脉血流导致良好的 Langendorff 血流。当切换到工作模式时，每分钟至少 30 毫升的主动脉血流有助于心脏储存。尽管基线痕迹良好，但一些心脏在长时间冷静态储存后没有产生良好的恢复。
