从脐带中分离和培养沃顿商学院果冻来源的间充质干细胞 （WJ-MSC）

首先，将所有无菌手术器械放在工作平台上。在生物安全柜中，用 75% 乙醇对含有先前收集的人脐带的管子表面进行消毒。将样品放入培养皿中。

将带有结的样品浸入 75% 乙醇中 30 秒。然后，在新的培养皿中，用无菌 PBS 多次冲洗样品。使用手术剪刀和镊子，剪掉结，然后将两个结之间的绳索横向剪成短块。

使用 1 毫升移液管用 PBS 灌注静脉，直到从脐带另一端流出的液体完全透明。将已经剪断的脐带之一转移到新的培养皿中。添加适量的 PBS 以在整个操作过程中保持电源线湿润。

用镊子抓住脐带，并在蚊夹的帮助下沿其长轴拉出动脉。要将脐带水平固定，较粗的一面朝上，将镊子的一个刀片插入脐静脉并拧紧夹住，确保镊子夹在较厚的一侧。使用手术刀，沿着镊子另一刀片的边缘，从一端到另一端在羊膜上皮层上做一个线性切口。

从切割间隙角开始，用齿夹抬起羊膜上皮的角，然后继续用角膜剪刀沿着上皮内表面水平切割再多一点。用夹子将沃顿氏胶和羊膜上皮分开，逐渐扩大到脐带一端的整个圆圈。纵向剥去上皮层。

将镊子的两个刀片插入静脉内。夹住一部分沃顿氏胶，然后将其翻过来，露出脐静脉的上皮。轻松剥离静脉的上皮。

将收集的沃顿商学院果冻放入预先标记的 90 毫米培养皿中，然后用剪刀和镊子将其切成一到三毫米的小块。将底部带盖的培养皿倒置，将其放入 5% 二氧化碳培养箱中，在 37 摄氏度下放置 30 分钟。每三天更换一次人间充质干细胞培养基。

与传统方法相比，独特的钝性解剖程序显示沃顿氏胶的产量显着增加。通过两种方法计算沃顿氏胶质间充质干细胞的总量，进一步分析表明，随着传代次数的增加，细胞数量存在明显的差距。新方法中 2 d 后间充质干细胞的增殖率显著升高。