首先,将聚二甲基硅氧烷 (PDMS) 的组分 A 和 B 以 10 比 1 的比例混合。充分搅拌混合物后,将混合物倒入母模中。将 PDMS 模具置于每平方英寸 1 磅的压力下 15 分钟,以去除气泡。
在 60 摄氏度下固化 PDMS 模具 2 小时。脱模以获得微针的生产模具。然后,使用前用超纯水清洗生产模具。
使用 BCA 检测试剂盒定量制备的外泌体溶液的蛋白质含量。向外泌体溶液中加入适量的 DPBS。现在,使用 DPBS 作为溶剂制备每毫升 200 毫克海藻糖的溶液。
搅拌 20 分钟以确保完全溶解。接下来,分别使用 DPBS 和乙醇作为溶剂,制备透明质酸和聚乙烯吡咯烷酮或 PVP 的溶液。搅拌过夜以确保完全溶解。
将外泌体溶液和海藻糖溶液按相等比例混合。加入等体积的透明质酸溶液并充分混合以获得尖端溶液。使用等离子清洗机,将 PDMS 模具表面以低等级加工 30 秒,以增强其亲水性。
将 40 微升尖端溶液添加到 PDMS 模具中。在室温下以 3, 000G 离心 3 分钟,以确保液体充满模具的针层。从模具中取出多余的液体,在真空干燥箱中室温下干燥一天。
然后,将 200 微升 PVP 溶液添加到 PDMS 模具中。在室温下以 3, 000G 离心 3 分钟,以确保液体充满模具的背衬层。将模具干燥一天后,脱模以获得加载外泌体的微针贴片。