首先,建立一个多物种根际生物膜,并获得微生物群细胞悬液。将三联酱油汤培养基与最低盐甘油谷氨酸培养基以一比一的比例混合。将细胞悬液在 30 摄氏度的培养基中孵育过夜以激活细菌。
将 100 微米尼龙池过滤器放在 24 孔板上。将细菌悬浮液重复接种 3 次,并在 30 摄氏度下培养表膜生物膜 36 小时。取下含有薄膜生物膜的过滤器,向新的 24 孔细胞板中加入 2 毫升 PBSS 缓冲液。
将过滤器放入板中以洗涤生物膜并去除游离细胞。在鉴定和培养生物膜中的主要 5 种物种后,在培养基中孵育合成群落的 31 种组合。按照上述程序,观察到黄瓜根际土壤微生物群的生物膜形成能力存在显着梯度。
生物膜扩增子测序证实了表膜中存在各种物种。