要开始肿瘤消化,请将样品倒入置于冰上的 60 毫米组织培养皿中。将 420 微升培养基从培养皿中移液到 1.5 毫升微量离心管中。使用镊子将样品组织转移到含有培养基的试管中。
用干净的剪刀将样品切成直径为 2 到 3 毫米的碎片。向样品中加入适当体积的消化酶和培养基。涡旋试管 5 秒钟,然后在垂直放置在其侧面的热混合器中孵育。
将 50 微米比色皿过滤器放在新的 15 毫升锥形管顶部。并用 1 毫升新鲜的 RPMI 培养基灌注过滤器。使用 1, 000 微升低张力宽移液器吸头,将样品加载到过滤器中并添加培养基。
然后,用注射器柱塞的背面研磨并以扭转方式将样品推到过滤器上。用 5 mL 培养基和培养皿中含有样品的任何剩余培养基清洗过滤器。