首先,将麻醉的鼠标仰卧在加热垫上。剃须和消毒后,将鼠标置于立体显微镜下。用剪刀沿腹部中线做一个大约 2 到 2.5 厘米的纵向切口。
使用经腹入路通过白线进入腹膜腔。放置牵开器以露出腹膜腔。使用浸有生理盐水的纱布将肠道和结肠塞入右半腹部。
使用镊子和棉签对肾下腹主动脉和下腔静脉附近的结缔组织和脂肪组织进行钝性分离。轻轻解剖腹主动脉,露出腹主动脉和上覆的大腰肌之间的间隙。将消毒过的化妆棉条插入缝隙中,而不会损坏腰动脉或静脉。
将浸泡在 0.9 摩尔氯化钙中的棉球放在腹主动脉外膜上。15 分钟后,取出棉球。用双蒸水将弹性蛋白酶稀释至每毫升 2 毫克。
使用胰岛素注射器,将 50 微升稀释的弹性蛋白酶涂抹在腹主动脉的肾下段。包裹化妆棉条以覆盖腹主动脉和下腔静脉。在浸润过程中用消毒纱布覆盖腹腔。
15 分钟后,小心地取下纱布和化妆棉条。将肠道和结肠移回原来的位置。用肠系膜覆盖处理过的主动脉,并用 0.9% 盐水润湿肠道以防止粘连。
使用 6-O 不可吸收聚丙烯缝合线,闭合肌肉层和皮肤。将鼠标放在啮齿动物超声机的加热垫上。将超声耦合应用于腹部,测量动脉瘤的最大直径和腹主动脉正常段的直径。
在 Excel 工作表中,计算肾下腹主动脉增加的百分比。检查后,用餐巾擦去剩余的超声波对联,并将鼠标放在加热垫上,直至完全恢复。在 PPE 加氯化钙中,91.67% 的小鼠在手术后 21 天发生腹主动脉瘤,而 Sham 组未观察到动脉瘤形成。
与 Sham 组相比,PPE 加氯化钙组肾下腹主动脉的平均最大内径显著增大。与 Sham 组相比,PPE 加氯化钙组肾下腹主动脉的平均最大外径显著增大。组织学检查显示,与 Sham 组相比,PPE 加氯化钙组主动脉壁增厚、炎性细胞浸润、细胞外基质降解、胶原纤维沉积和弹性纤维分解。