首先,准备氧化石墨烯/铜纳米复合材料。第一天,使用环将琼脂平板中的一个细菌菌落接种到 10 毫升肉汤中。使用设置为 37 RPM 的振荡培养箱在 200 摄氏度下孵育肉汤 24 小时。
第二天,使用 DPBS 稀释纳米复合材料混合物以获得三种不同的浓度,并准备用于实验的对照溶液。然后将 100 微升纳米复合悬浮液和对照溶液分配到 96 孔板中。根据 CFU,在胰蛋白酶大豆肉汤中将细菌悬浮液稀释至每毫升 6 CFU 的 1 倍至 6 CFU 的幂。
将 100 微升稀释的细菌悬浮液接种到 96 孔板的样品孔中,并在 37 摄氏度下将板在设置为 200 RPM 的振荡培养箱中孵育 24 小时。第三天,用 200 微升微量移液器将样品和细菌悬浮液剧烈混合,然后用无菌蒸馏水连续稀释样品细菌混合物 10 倍。然后用撒布器将 100 微升稀释的细菌悬浮液涂布在琼脂平板上,并在 37 摄氏度下孵育平板 24 小时。
第四天,计数细菌菌落并确定 CFU 值,以使用方程式确认纳米复合材料的抗菌活性。纳米复合材料对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌表现出显着的抗菌功效,在 500 μg/mL 浓度下分别根除 99.8% 和 84.7% 的细菌。