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01:36 min
April 19th, 2024
DOI :
10.3791/202268-v
* 这些作者具有相同的贡献
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首先,准备纤维蛋白原噬菌体的凝胶,并将其与胶模一起放入电泳槽中。将 1, 300 毫升电泳溶液倒入电泳槽中,然后从凝胶中取出电泳梳。将 5 μL 的 5x 非变性上样缓冲液与 20 μL 的纤维蛋白溶解酶和花生蠕虫匀浆混合。
将混合物上样到制备的凝胶中,以 80 伏电压启动电泳 30 分钟或 120 伏电压持续 20 分钟。从胶模中取出凝胶并将其转移到塑料盒中。将 Tris-HCL 和 Triton 加入盒子中,并在摇床上以 60 至 70 RPM 的转速孵育 10 分钟。
去除洗涤缓冲液,将凝胶与 50 毫升 0.05 摩尔 Tris-HCL 一起孵育。去除缓冲液后,将凝胶与 50 mL 染色液一起孵育,然后以 60 至 70 RPM 的转速孵育脱色溶液,每次 30 分钟。花生蠕虫匀浆显示出对应于 25、33、43 和 70 千道尔顿或更高分子量的条带。
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使用 Fibrinogen-PAGE 揭示花生蠕虫中的纤维蛋白原溶解剂
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