小脑器官型培养物的制备，用于研究浦肯野细胞中的 DNA 损伤反应

首先，在冷解剖缓冲液中从 10 天大的小鼠幼崽获得小脑。去除多余的缓冲液后，将小脑垂直放置在切割平台上。以 350 微米的切片厚度进行矢状旁切片。

用细鸢尾刮刀轻轻分离切片，然后放入冷解剖培养基中。在双筒望远镜下，使用两个弯曲的虹膜刮刀小心地将组织切片彼此分开。对于培养，使用来自位于器官内侧皮质核区的小脑蚓的切片。

使用宽刮刀，将每个组织切片转移到培养插入物上。将每个携带组织切片的小插曲移入含有预热培养基的六孔板中的孔中。在孵育过程中，用无菌玻璃移液管吸出用过的培养基。

使用 5 毫升血清移液管，加入 1 毫升新鲜基础培养基 eagle，移液器尖端靠在孔壁上，不干扰组织。